1、原理

分光光度法分析的原理是利用物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的光呈現(xiàn)選擇性吸收現(xiàn)象來進(jìn)行物質(zhì)的定性和定量分析。本儀器根據(jù)相對(duì)測(cè)量原理先設(shè)定參比樣品（溶劑、蒸餾水、空氣等）的透射比為100％。再測(cè)量待測(cè)樣品的透射比，從而達(dá)到分析的目的。測(cè)得的透射比與待測(cè)樣品的濃度之間關(guān)系，在一定范圍內(nèi)符合郎伯－比耳定律。

A=KCL=-logI/I0

T=I/I0

其中：T透射比（透過率）

           A 吸光度

           C 溶液的濃度

           K 溶液的吸收系數(shù)

           L 溶液的光徑長(zhǎng)度

           I 透射光強(qiáng)度

           I0 入射光強(qiáng)度特點(diǎn)

72、75系列分光光度計(jì)是一款結(jié)合現(xiàn)代精密光學(xué)和微電子等高新技術(shù)，研制開發(fā)的新穎的分光光度計(jì)，它具有以下特點(diǎn)：

采用低雜散光，高分辨率的光柵型單光束光路結(jié)構(gòu)，儀器具有良好的穩(wěn)定性，重現(xiàn)性，光度線性和的測(cè)量讀數(shù)。更小的光譜帶寬可滿足常規(guī)分析測(cè)試項(xiàng)目的要求。

采用*化設(shè)計(jì)和微處理機(jī)技術(shù)，使儀器具有自動(dòng)調(diào)0％T和100％T等控制功能以及T、A、C、F等測(cè)試方式（721型無C、F測(cè)試方式）。

數(shù)字顯示器可明亮清晰地顯示透射比、吸光度和濃度等參數(shù)，提高了儀器的讀數(shù)準(zhǔn)確性。

儀器配有標(biāo)準(zhǔn)的RS-232雙向通訊接口（721無此接口），不僅可連接串口打印機(jī)，同時(shí)還可以連接計(jì)算機(jī)（可在Windows操作系統(tǒng)下運(yùn)行SPD用戶應(yīng)用軟件），具有光度測(cè)試（T、A）、定量測(cè)試（C、F）及時(shí)時(shí)間掃描等應(yīng)用功能。可進(jìn)行數(shù)據(jù)采集，保存和調(diào)用。用途

可供物理學(xué)、化學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、藥物學(xué)、地質(zhì)學(xué)等學(xué)科進(jìn)行科學(xué)研究，是廣泛應(yīng)用于化工、藥品、生化、冶金、輕工、食品、材料、環(huán)保、醫(yī)學(xué)化驗(yàn)等行業(yè)及分析行業(yè)中zui重要的質(zhì)量控制儀器之一，是常規(guī)實(shí)驗(yàn)室的*儀器。

二、            儀器結(jié)構(gòu)原理和光學(xué)系統(tǒng)光學(xué)系統(tǒng)原理

儀器采用光柵型單光束結(jié)構(gòu)光路，光學(xué)系統(tǒng)原理如圖二所示，由鹵鎢燈或氚燈發(fā)出的連續(xù)輻射經(jīng)聚光鏡聚光后投向單色器入射狹縫，此狹縫正好處于聚光鏡及單色器內(nèi)準(zhǔn)直鏡的焦平面上，因此進(jìn)入單色器的復(fù)合光通過平面反射鏡及準(zhǔn)直鏡變成平行光射向色散元件光柵，光柵將入射的復(fù)合光通過衍射作用形成按照一定順序均勻排列的連續(xù)單色光譜，此單色光譜重新回到準(zhǔn)直鏡上。由于儀器出射狹縫設(shè)置在準(zhǔn)直鏡的焦平面上，這樣，從光柵色散出來的單色光譜經(jīng)準(zhǔn)直鏡聚光后成象在出射狹縫上，出射狹縫選出帶寬的單色光通過聚光鏡落在樣品在樣品室被測(cè)樣品中心，樣品吸收后透射的光射后光電池接收面。、整機(jī)原理

儀器微機(jī)的中央控制中心為CPU，并有程序存儲(chǔ)器（ROM）和數(shù)據(jù)存儲(chǔ)器（RAM）通過輸入輸出接口分別對(duì)顯示器，鹵鎢燈穩(wěn)壓電路等進(jìn)行控制。其結(jié)構(gòu)原理方框圖如圖一所示。

由鍵盤輸入測(cè)量方式（T、A、C、F）和測(cè)量參數(shù)后，由CPU根據(jù)ROM設(shè)定的程序和RAM存儲(chǔ)的數(shù)據(jù)控制測(cè)量方式，并對(duì)儀器提供的測(cè)量訊號(hào)進(jìn)行處理和控制，實(shí)現(xiàn)測(cè)量和相應(yīng)的運(yùn)算。

工作原理：

通電開機(jī)后點(diǎn)燃電源燈，這時(shí)光源燈發(fā)出的復(fù)合光進(jìn)入單色器，經(jīng)光柵色散由出射狹縫射出一束單光，經(jīng)樣品室被光電池接收并轉(zhuǎn)換為電訊號(hào)。通過放大器的放大和A/D變換后至CPU，CPU根據(jù)收到的訊號(hào)和調(diào)0％T、調(diào)100％T指令，由軟件自動(dòng)控制，使訊號(hào)保持穩(wěn)定的輸出，使數(shù)顯屏上顯示100％T（或0.000A），實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)調(diào)0％T、調(diào)100％T的目的。

測(cè)量時(shí)設(shè)定測(cè)試波長(zhǎng)，參比槽內(nèi)放入?yún)⒈葮悠罚?00％T鍵，CPU根據(jù)接收到的指令，自動(dòng)調(diào)整100％T/0A。當(dāng)樣品槽內(nèi)待測(cè)樣品進(jìn)入光格，單色光被待測(cè)樣品吸收后投射出的單色光被光電池接收，轉(zhuǎn)換成與待測(cè)樣品透射光強(qiáng)度成一定比例的電訊號(hào)，在與參比樣品相同水平的狀態(tài)下，經(jīng)放大器放大和A/D變換后，由CPU控制顯示出待測(cè)樣品的透射比或吸光度。     儀器安裝

1、儀器工作環(huán)境

1）儀器的額定電壓為220V±22V，50HZ±1HZ。供電電壓不正常會(huì)使儀器無法正常工作。

2）儀器應(yīng)安裝在干燥的室內(nèi)，環(huán)境溫度為5℃～35℃（*為15℃～28℃），相對(duì)濕度不大于85％（一般控制在45％～65％）。

3）儀器應(yīng)安裝在堅(jiān)固平穩(wěn)的工作臺(tái)上，且無強(qiáng)烈的震動(dòng)或持續(xù)震動(dòng)。

4）室內(nèi)無硫化氫，亞硫酸氟等腐蝕性氣體。

5）儀器應(yīng)遠(yuǎn)離高強(qiáng)度磁場(chǎng)，電場(chǎng)及會(huì)產(chǎn)生高頻波的設(shè)備。

6）儀器應(yīng)避免強(qiáng)風(fēng)的直接吹襲。

7）儀器應(yīng)避免光的直接照射。

8）儀器供電電源應(yīng)有良好的接地（具有獨(dú)立的地線）。

2、儀器安裝

1）開箱后檢查儀器是否有損壞，并根據(jù)裝箱單核對(duì)附件是否齊全。

2）確認(rèn)配件無誤后，插入電源線并接通電源。

3）檢查儀器是否工作正常。

四、            儀器使用

1、開機(jī)預(yù)熱

儀器在使用前應(yīng)預(yù)熱30分鐘。

2、波長(zhǎng)調(diào)整

轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)旋鈕，并觀察波長(zhǎng)顯示窗，調(diào)整至需要的測(cè)試波長(zhǎng)。

注意事項(xiàng)：轉(zhuǎn)動(dòng)測(cè)試波長(zhǎng)調(diào)滿度后，以穩(wěn)定5分鐘后進(jìn)行測(cè)試為好（符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及檢定規(guī)程要求）

3、設(shè)置測(cè)試模式

按動(dòng)“功能鍵”，便可切換測(cè)試模式。

4、結(jié)果打印（721型無此功能）

在得到測(cè)試結(jié)果后按下“打印”鍵便可打印結(jié)果（需外接標(biāo)準(zhǔn)串行打印機(jī)）。

5、光源切換（適用于752、754、755B型）

因?yàn)閮x器在紫外區(qū)和可見區(qū)使用不同的光源，所以需要撥動(dòng)光源切換桿來手動(dòng)的切換光源。建議的光源切換波長(zhǎng)為340nm，即200nm～340nm使用氚燈，340nm～1000nm使用鹵鎢燈。

注意事項(xiàng)：如果光源選擇不正確，或光源切換桿不到位，將直接影響儀器的穩(wěn)定性。特殊測(cè)試要求除外

6、比色皿配對(duì)性

儀器所附的比色皿是經(jīng)過配對(duì)測(cè)試的，未經(jīng)配對(duì)處理的比色皿將影響樣品的測(cè)試精度。石英比色皿一套兩只，供紫外光譜區(qū)使用，置入樣品架時(shí)，兩只石英比色皿上標(biāo)記Q或箭頭方向要一致。玻璃比色皿一套四只，供可見光譜區(qū)使用。

7、調(diào)T零（0％）

在T模式時(shí)，將遮光體置入樣品架，合上樣品室蓋，并拉動(dòng)樣品架拉桿使其進(jìn)入光路。然后按動(dòng)“0％T”按鈕，顯示器上顯示“00.0”或“-00.0”，便完成調(diào)T零，完成調(diào)T零后，取出遮光體。

注意事項(xiàng)：1.測(cè)試模式應(yīng)在透射比（T）模式；

          2.如果未置入遮光體合上樣品室蓋，并使其進(jìn)入光路便無法完成調(diào)T零；

          3.調(diào)T零時(shí)不要打開樣品室蓋，推拉樣品架；

          4.調(diào)T零后，如切換至吸光度測(cè)試模式，顯示器上顯示為“.EL”。

          5.如直接在吸光度（A）模式調(diào)T零，則不管顯示器上是否顯示“.EL”，均需按動(dòng)“0％T”按鈕。

8、調(diào)100％T/OA

將參比樣品置入樣品架，并推拉樣品架拉桿使其進(jìn)入光路。然后按動(dòng)“100％T”按鈕，此時(shí)屏幕顯示“BL”延時(shí)數(shù)秒便顯示“100.0”（在T模式時(shí)）或“-.000”、“.000”（在A模式時(shí)），即自動(dòng)完成調(diào)100％T/OA。

注意事項(xiàng)：調(diào)100％T/OA時(shí)不要打開樣品室蓋、推拉樣品架。

9、吸光度測(cè)試

1.    按動(dòng)“功能鍵”，切換至透射比測(cè)試模式。

2.    調(diào)整測(cè)試波長(zhǎng)。

3.    置入遮光體，合上樣品室蓋，并使其進(jìn)入光路，按動(dòng)“0％T”鍵調(diào)T零，此時(shí)儀器顯示“00.0”或“-00.0”.

4.    按動(dòng)“功能鍵”，切換至吸光度測(cè)試模式。

5.    置入?yún)⒈葮悠罚磩?dòng)“100％T”鍵，此時(shí)儀器顯示“BL”延時(shí)數(shù)秒后便顯示“-.000”或“.000”置入待測(cè)樣品，讀取測(cè)試數(shù)據(jù)。